转膜实验操作步骤:

1 取出电泳后的制作好的胶，用刮胶版去掉样品孔上的凝胶

2 将配置好的转膜缓冲液倒入转膜槽中，将海绵和滤纸浸泡一分钟，拿出放在转印夹面板上。注意: NC 膜无正反面区分，如果使用 PVDF膜话，需要甲醇预先活化

1分钟

三明治的顺序是面板 (正极) -海绵-三层滤纸-NC膜-胶滤纸-海绵-面板 (负极)

3 用刮胶板将凝胶与玻璃板分离，将凝胶取出放在滤纸上，确保胶与膜完全贴合并处于滤纸中间位置 个注意:胶无正反面，胶放到负极黑色面板上

4 用子将NC膜放在转膜液中润湿即可，盖在凝胶上

5 用醇进行润湿，再拿滚轮赶出胶与膜之间的气泡(不会有气泡产生)，盖上3层滤纸、一块海绵，扣好3明治转印夹，将其垂直插入缓冲液槽中，确定转印夹黑色面对应于黑色电极

6 盖好转膜槽盖子，接通电源，恒压400ma转膜时间20min

7 转膜之后我们采用丽春红染色液进行染色，看蛋白条带效果

8 转完膜以后，这个残胶用即蓝染色液染色，胶上【任何蛋白残留 】 

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